細(xì)胞凍存液氮罐使用過程中需要注意些啥 查特杜瓦瓶 凍存細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟 (1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。 (2)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘
細(xì)胞凍存液氮罐使用過程中需要注意些啥
查特杜瓦瓶
凍存細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟
(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
?。?)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內(nèi)使其完全融化,然后在無菌下取出細(xì)胞。
?。?)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代?;驘o需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
液氮罐一般可分為液氮貯存罐、液氮運(yùn)輸罐兩種。貯存罐主要用于室內(nèi)液氮的靜置貯存,
液氮罐不宜在工作狀態(tài)下作遠(yuǎn)距離運(yùn)輸使用;液氮運(yùn)輸罐為了滿足運(yùn)輸?shù)臈l件,做了專門的防震方面的設(shè)計(jì)。其除可靜置貯存外物品外,還可在充裝液氮狀態(tài)下,作為運(yùn)輸使用,但是也應(yīng)避免劇烈的碰撞和震動。
1.罐子在使用過程中,每天都應(yīng)隨時檢查罐子的使用情況,在罐子內(nèi)有液氮的前提下,發(fā)現(xiàn)罐子瓶蓋上和上部有水珠或結(jié)霜情況,說明罐子質(zhì)量有問題,應(yīng)立即停止使用;
2.在罐子瓶蓋上和上部無水珠或結(jié)霜現(xiàn)象時,用手觸摸外殼,感覺上部冷,下部熱,說明罐子質(zhì)量有一些問題,即液氮日增損較大,應(yīng)注意觀察,防止液氮耗損完后,所貯存的物質(zhì)損壞,必要時,好停止使用;若上下溫度一致,說明罐子質(zhì)量沒有問題。
3.打開瓶塞后,瓶口內(nèi)的霧氣不往外溢,而往下沉,說明罐子是好的。
4.用耳朵從瓶口處聽罐子內(nèi)是否有氣泡聲,如較頻繁則罐子質(zhì)量有問題,反之則無問題。
查特杜瓦瓶