怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來(lái)講,凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作: 查特杜瓦瓶 1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎
怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來(lái)講,凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作:
查特杜瓦瓶
1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;
2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。
4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期。
查特杜瓦瓶
5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐*好;或者可以在4℃,2h;